高效液相色谱仪使用方法

日期：2025-04-30 15:54

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摘要：1. 样品处理: 样品浓度:1mg/mL(常用色谱甲醇解) 样品体积:1mL 装样瓶:2mL玻璃进样小瓶(样品量少可加内衬管) 进样体积:5uL 2. 前期检查工作: 储液瓶包括：清洗管路:20%甲醇；跑样品:A:超纯水(1-2天一换)、B:有机溶剂 ① 检查储液瓶液体量是否够用. ② 检查储液瓶液体是否有沉淀(若有需更换，更换需起声除气泡w:40Hz) ③ 检查废液瓶是否还有空间。 3. 仪器设置: ① 先开电脑后开色谱仪； ② 左侧打开2695，等待机器自检。（若长时间不用，打开机器下方盖子检查混合溶剂管道有无液体；若无液体，连上注射器将黑色旋钮逆时针旋转...

1. 样品处理:
样品浓度:1mg/mL(常用色谱甲醇解)
样品体积:1mL
装样瓶:2mL玻璃进样小瓶(样品量少可加内衬管)
进样体积:5uL
2. 前期检查工作:
储液瓶包括：清洗管路:20%甲醇；
跑样品:A:超纯水(1-2天一换)、B:有机溶剂
① 检查储液瓶液体量是否够用.
② 检查储液瓶液体是否有沉淀(若有需更换，更换需起声除气泡w:40Hz)
③ 检查废液瓶是否还有空间。
3. 仪器设置:
① 先开电脑后开色谱仪；
② 左侧打开2695，等待机器自检。（若长时间不用，打开机器下方盖子检查混合溶剂管道有无液体；若无液体，连上注射器将黑色旋钮逆时针旋转开始抽，抽到液体后，顺时针拧紧黑色旗扭，拔下注射器。
③ 系统清洗:System·prep (0.2 mL/min、 50% A、50% B)
④ 密封圈和针头清洗:Diagnose → prime needle wash (3min) → Half→ prime seal wash → close →edit
⑤ Menu:假如更换了A储液瓶，则将A泵比例调整为100% （direct function → wet prime (5mL/min 2 min) →OK）
⑥ 根据需要调整流动相比例并设置流速。（5 mm*大流速 1 mL/min ; 10 mm *大流速 5mL/min；20 mm *大流速 10mL/min；）
⑦ 等出液口有溶剂流出才能打开 2695 TUV 检测器，等待两个指示灯均为绿色时机器便可开始使用。
⑧ **次跑样品的时候先设置好自己的项目，接着打开自己的项目设置“方法”，方法包括仪器方法和数据的处理方法，一般我们只需要设置仪器方法，主要设置的是流动相的比例和时间以及检测器的参数。检测器是DAD检测器可扫描样品的范围波长，查看样品的紫外特征吸收，打开3D，并设置两个常用波长：210nm和254nm。柱温箱需要关闭。设置好仪器方法后保存并通过“下一步”保存到“方法”下面，保存为方法后开始跑样品，把样品在样品盘上的编号输入到界面上，其余数据依次输入，时间需要根据仪器方法的时间来设置。

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